Thèse Métabolisme et Méthylation M6a de l'Arn dans la Lésion Pulmonaire Aiguë Voies de Restauration de l'Homéostasie Immunitaire et Cibles Thérapeutiques H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université Paris-Saclay GS Santé et médicaments École doctorale : Innovation thérapeutique : du fondamental à l'appliqué Laboratoire de recherche : Dysfonction d'organes et Microcirculation Direction de la thèse : Alice HUERTAS ORCID 000000018545747X Début de la thèse : 2026-11-01 Date limite de candidature : 2026-09-01T23:59:59 Le syndrome de détresse respiratoire aiguë (ARDS) est une pathologie pulmonaire inflammatoire sévère caractérisée par la perte de l'intégrité de la barrière alvéolo-capillaire, l'oedème pulmonaire et l'altération des échanges gazeux. Malgré les progrès des soins de support, la mortalité reste élevée (30-40%) et les traitements pharmacologiques efficaces font défaut. L'«#obesity paradox#» suggère que l'obésité pourrait moduler favorablement la réponse inflammatoire, pointant vers le rôle de la leptine, hormone dérivée du tissu adipeux, régulatrice des réponses immunitaires et inflammatoires. Son implication dans la lésion pulmonaire aiguë (ALI) demeure controversée.
Parallèlement, la méthylation de l'ARN en position N6 (m6A) contrôle la stabilité des ARNm codant pour les cytokines et module l'activation immunitaire. L'interaction entre leptin et la régulation de la méthylation des ARNm dans l'ALI n'a pas été élucidée. Nos données préliminaires montrent que les souris déficientes en leptine sont protégées contre l'ALI induite par l'acide et que la signalisation dépendante de la leptine influence l'expression des enzymes régulant la m6A dans le poumon.
Nous postulons que la leptine module les voies épitranscriptomiques pour contrôler l'activation immunitaire et la perméabilité endothéliale. Le projet comprend trois objectifs#: (1) analyser l'impact de la leptine sur la dysrégulation immunitaire et la barrière pulmonaire, (2) étudier la modulation des enzymes régulants la méthylation de l'ARNm par la leptine et identifier les transcrits clés, et (3) évaluer l'effet thérapeutique d'inhibiteurs de la leptine et de modulatrices de m6A in vivo et ex vivo.
Nous combinons modèles murins d'ALI, poumons perfusés isolés et cultures cellulaires humaines, avec techniques établies de RT-qPCR, Western blot, cytométrie en flux et séquençage. Ce projet vise à révéler de nouvelles cibles thérapeutiques pour réduire la mortalité liée à l'ARDS et faciliter la traduction clinique. Le syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA) est une forme sévère d'insuffisance respiratoire, avec une mortalité élevée, caractérisée par une hypoxémie aiguë, un oedème pulmonaire non cardiogénique et une altération des échanges gazeux liée à une augmentation de la perméabilité de la barrière alvéolo-capillaire
La physiopathologie du SDRA repose sur une réponse inflammatoire dérégulée conduisant à une lésion pulmonaire aiguë (ALI). Cette inflammation altère l'intégrité de la barrière microvasculaire pulmonaire, entraînant une accumulation d'oedème riche en protéines, une dysfonction du surfactant et une diminution de la compliance pulmonaire. Malgré de nombreuses recherches, aucun traitement pharmacologique curatif efficace n'est disponible. Une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la dysrégulation immunitaire pulmonaire est donc essentielle.

Signalisation de la leptine et inflammation pulmonaire: Un aspect encore mal compris du SDRA concerne le rôle de l'obésité dans l'évolution clinique. Alors que certaines études montrent un meilleur pronostic des patients obèses dans certaines pneumonies, l'obésité a été associée à une aggravation des formes sévères de COVID-19. Ces observations suggèrent un rôle complexe de la leptine dans les réponses inflammatoires pulmonaires. La leptine, hormone produite par le tissu adipeux, agit non seulement comme régulateur de la satiété mais également comme médiateur immunitaire. Elle exerce ses effets via le récepteur ObR, activant principalement la voie JAK-STAT3. Dans le poumon, la leptine et son récepteur sont exprimés par plusieurs types cellulaires pulmonaires, suggérant un rôle important dans l'homéostasie pulmonaire. Les données préliminaires du laboratoire suggérent un rôle délétère de la leptine dans l'inflammation pulmonaire et la perte d'intégrité de la barrière alvéolo-capillaire.

Épitranscriptomique m6A et ALI: Les modifications post-transcriptionnelles de l'ARN, notamment la méthylation N6-méthyladénosine (m6A), sont récemment apparues comme des régulateurs majeurs des réponses immunitaires et inflammatoires. La méthylation m6A est contrôlée par des enzymes « writers » (METTL3, METTL14), « erasers » (ALKBH5, FTO) et « readers ». Des travaux récents montrent que les modifications m6A régulent la stabilité et la traduction d'ARNm impliqués dans l'inflammation. Les données préliminaires du laboratoire suggérent une interaction entre signalisation leptinique et régulation m6A. L'objectif global de ce projet est une meilleure compréhension de la physiopathologie du Syndrome de Détresse Respiratoire Aiguë (SDRA), et en particulier des des mécanismes sous-jacents à la dérégulation de la réponse immunitaire au cours de l'acute lung injury (ALI) expérimental.

Hypothèse et objectifs
Nous faisons l'hypothèse que la signalisation de la leptine régule la machinerie épitranscriptomique m6A, modulant ainsi l'activation immunitaire et la dysfonction de la barrière endothéliale au cours de l'ALI.

Le projet repose sur trois objectifs :
1) Déterminer le rôle de la leptine dans la dysrégulation immunitaire pulmonaire au cours de l'ALI
2) Étudier l'implication des modifications ARN m6A dans la pathogenèse de l'ALI et leur lien avec la leptine
3) Évaluer des approches thérapeutiques ciblant la leptine et/ou la régulation m6A afin de restaurer l'homéostasie pulmonaire Nous utiliserons un modèle murin d'ALI induite par instillation intranasale d'acide chlorhydrique (HCl pH 1,2), reconnu pour sa reproductibilité dans l'étude des lésions de la barrière alvéolo-capillaire. Des souris sauvages C57BL/6J et des souris déficientes en leptine (ob/ob) seront comparées.
Sur la base des résultats obtenus, nous évaluerons différentes stratégies thérapeutiques visant à restaurer l'homéostasie pulmonaire.
Ces traitements seront étudiés seuls ou en combinaison afin d'évaluer leur capacité à réduire l'oedème pulmonaire, limiter l'inflammation et préserver l'intégrité de la barrière alvéolo-capillaire.

Le candidat devra montrer des aptitudes à mener un travail au sein d'une équipe, faire preuve de curiosité et de rigueur.